Как сделать пробу на совместимость крови донора и реципиента

Добавил пользователь Валентин П.
Обновлено: 09.10.2024

Крайне важное значение для клинической практики имеет определение антигенов эритроцитов – идентификация группы крови и резус-фактора. Группа крови человека определяется наличием на поверхности эритроцита антигенов и является индивидуальным признаком. Эритроцитарные поверхностные антигены эритроцитов определяет фенотип эритроцитов или группу крови человека.

В настоящее время известно более 200 антигенов эритроцитов, поэтому группа крови может отличаться в зависимости от количества используемых антисывороток для идентификации антигенов на поверхности эритроцитов. Эритроцитарные антигены, идентифицированные в популяции в 1% случаев, считаются редкими.

Основной системой идентификации групп крови является система АВО, в которой группа крови характеризуется наличием на поверхности эритроцитов антигенов А, В, АВ или их отсутствием (О), т.е. четыре группы крови. В некоторых руководствах встречается дополнительная маркировка групп крови: О (I); А(II); В (III) и АВ (IV).

Выявление в 1901 г. эритроцитарных антигенов положило начало изучению допустимости смешивания эритроцитов разных групп, т.е. совместимости гемотрансфузий. В крови (сыворотке) каждого индивидуума циркулируют антитела (называемые так же агглютинины), активные в отношении чужеродных антигенов. Взаимодействие антиген-антитело приводит к агглютинации (слипанию) и разрушению эритроцитов. В крови индивидуумов с группой крови А циркулируют антитела против антигенов В. Индивидуумы с группой крови В имеют антитела, против антигенов А. При группе крови О в сыворотке определяются антитела анти-А, анти-В, тогда как при группе крови АВ ни антитела А, ни антитела В в сыворотке не определяются.

Таким образом, индивидуумы с группой крови АВ являются универсальными реципиентами иногрупной крови.

Индивидуумы с группой крови О, эритроциты которых не имеют на поверхности ни А, ни В антигенов, являются универсальными донорами.

Антитела к эритроцитарным антигенам А или В являются генетически детерминированными, в соответствии с группой крови эритроцитов, тогда как антитела к другим поверхностным антигенам эритроцитов являются приобретенными. Пациенты, получающие трансфузии, со временем накапливают антитела, что может осложнять подбор требуемой группы крови. Для таких пациентов важно выполнять типирование группы крови с оценкой возможно большего спектра антител сыворотки.

Группа крови оценка совместимости

Для оценки совместимости групп крови и возможности трансфузий необходимо исследование реакции антител сыворотки донора и эритроцитов реципиента, а также эритроцитов донора и антител сыворотки реципиента.

При совместимости групп крови смешивание эритроцитов и сыворотки не приводит к изменению состава и окраски реакционной капли.

При несовместимости групп смешивание эритроцитов донора и сыворотки пациента вызывает реакцию агглютинации – образование в капле неоднородностей в виде слипшихся эритроцитов, точечно насыщающих поле реакции.

Резус-фактором (Rh) называют антиген D, который может располагаться на поверхности эритроцитов. Наличие или отсутствие этого антигена на поверхности эритроцитов индивидуума определяет такую характеристику группы крови, как резус положительная или резус отрицательная (Rh+ или Rh–). Примерно 85% популяции людей имеют резус-положительную группу крови (Rh+).

В отличие от антител к антигенам АВ, антитела к антигену D не присутствуют в крови. При контакте крови резус-положительной группы с резус-отрицательной, происходит сенсибилизация и синтез анти-резусных антител. Такая реакция развивается, например, при беременности Rh– матери Rh+ плодом. Выход фетальных клеток во время родов в кровоток матери активизирует синтез антирезусных антител. В случае пересечения антирезусными антителами плацентарного барьера и попадания в кровь плода, развивается гемолитическая желтуха новорожденного, обусловленная разрушением эритроцитов.

Определение резус фактора необходимо для каждого индивидуума в дополнение к определению группы крови. Отмечено, что выраженность структуры эритроцитарного антигена различна у здоровых людей и тем более у иммуноскомпроментированных больных, беременных женщин.

В настоящее время определение групп крови, резус фактора, продукции антиэритроцитарных антител выполняется в автоматическом режиме стандартизированными методами, позволяющими одномоментно проводить как типирование групп крови, определение продукции антител, так и совместимости возможных трансфузий. Визуальное отображение полученной карты для каждого пациента может быть востребовано в течение всей жизни пациента, она хранится в базе данных лаборатории.

Показания к исследованию: Любое стационарное лечение, беременность.

Условия взятия и хранения образца

Для исследования используется венозную кровь, взятую с ЭДТА или без консервантов. Взятие крови производится натощак, или не менее чем через 8 ч после последнего приема пищи. Образец крови может храниться при температуре от 4–8 °С не более 24 ч.

Результаты исследования

Группа крови системы АВО:

0 (I) – первая группа;
A (II) – вторая группа;
B (III) – третья группа;
AB (IV) – четвертая группа крови.

Резус принадлежность

Rh (+) положительная;
Rh (–) отрицательная.

Методика проведения анализа

Алгоритм определения группы крови AB0 и резус-фактора цоликлонами облегчает и стандартизирует процедуру типирования. Позволяет однозначно интерпретировать результат реакции антиген/антитело. Для каждого исследования по системе AB0 достаточно одной серии реагентов. Объект исследования – цельная кровь, эритроцитарная масса, отмытые эритроциты, клетки крови в сыворотке или физрастворе.

В качестве примера приводим схему проведения типирования крови человека по системе антигенов AB0.

Обеспечьте яркое освещение помещения и температуру воздуха 15 – 25 °C.
Промаркируйте лунки планшета: Анти-A, Анти-B, Анти-AB.
Добавьте в подписанные лунки по одной капле (приблизительно 0,1 мл) реагентов Анти-A, Анти-B, Анти-AB.
Поместите по одной маленькой капле концентрированной эритроцитосодержащей среды (0,01 – 0,03 мл) рядом с большой каплей каждого реагента.
В каждой из трех лунок отдельной стерильной стеклянной палочкой смешайте моноклональный реагент с кровью.
Плавно покачивайте планшет 2,5 – 3 минуты. Обычно агглютинация формируется в течение 5 – 10 секунд. Запас времени необходим для обнаружения слабых вариантов антигенов.
Проведите визуальную оценку результатов реакции в каждой лунке. Результат реакции свидетельствует об обнаружении соответствующего агглютиногена.

отбор образца крови

внесение образца в лунку

планшет с внесенными образцами

добавление реагентов

планшет с эритроцитами и реагентами

Результаты реакции

Таблица результатов типирования крови с помощью цоликлонов.

Групповая принадлежность	Моноклональный реагент
Групповая принадлежность	Анти-A	Анти-B	Анти-AB
0(I)	-	-	-
A(II)	+	-	+
B(III)	-	+	+
AB(IV)	+	+	+

Отрицательный результат реакции во всех трех лунках свидетельствует об отсутствии агглютиногенов. Группа: 0(I).
Агглютинация с Анти-A и Анти-AB говорит о наличии агглютиногена A. Групповая принадлежность: A(II).
Реакция в лунках с Анти-B и Анти-AB указывает на наличие антигена B. Групповая принадлежность: B(III).
Реакция во всех трех лунках говорит о присутствии обоих антигенов. Группа: AB(IV).

смешивание анализируемых проб с цоликлонами

инкубация планшета после перемешивания

результат реакции

визуальная оценка результатов реакции

регистрация результатов анализа

Методика проведения исследования с помощью цоликлонов требует обязательного подтверждения результатов реакции выявлением агглютининов a и v стандартными эритроцитами.

Главная >
Трансфузиология и донорство крови >
Донору >
Словарь донора

Словарь донора

Аутодонорство

Заготовка по определенной схеме собственной крови пациента перед плановой операцией. Во время операции или в раннем послеоперационном периоде пациенту переливают компоненты его собственной крови (см. аутологичная трансфузия), что позволяет избежать риска инфицирования и иммунологических реакций.

Аутологичная трансфузия

Процедура переливания предварительно полученных компонентов крови, где донор и реципиент — одно и то же лицо.

Аферез

Метод получения компонентов крови путем ее разделения на составные части и отбора требуемых компонентов с возвратом оставшихся компонентов донору.

Биологическая полноценность крови и ее компонентов

Способность донорской крови компенсировать недостаточные биологические функции крови реципиента.

Вирусинактивация крови

Обезвреживание вирусов крови с помощью различных методов, например, химической и термической обработки.

Гематология

Раздел медицины, изучающий кровь, органы кроветворения и заболевания крови. Гематология изучает этиологию, диагностику, лечение, прогнозирование и предотвращение заболеваний системы крови, которые влияют на производство крови и её компонентов, а именно клетки крови, гемоглобин, белки крови, и механизм коагуляции (свертывание крови). Научные исследования в этой области зачастую ведутся специалистами биомедицины. Гематологи также занимаются исследованиями в области онкологии — лечения рака.

Гемотрансмиссивные инфекции

Инфекционные заболевания, возбудитель которых может передаваться с донорской кровью или ее компонентами.

Группа крови системы АВ0

Тип крови, отличающийся от других типов по иммунoгeнетическому признаку: наличию или отсутствию на эритроцитах крови определенных веществ — агглютиногенов (антигенов). В основу обозначения групп положено наличие на поверхности эритроцитов человека двух антигенов А и В, которые у разных людей могут быть каждый в отдельности, оба вместе или отсутствовать. Кровь людей, эритроциты которых не содержат антигенов, относят к первой группе и обозначают 0 (I). Вторую группу крови, соответственно ее антигену А, обозначают А (II), третью группу обозначают В (III), так как она имеет антиген В, четвертую группу крови, когда на эритроцитах имеются оба антигена А и В, обозначают АВ (IV). Группа крови обязательно учитывается при переливании крови. Уникальность системы АВ0 состоит в том, что в плазме людей имеются антитела к отсутствующему на эритроците антигену: у лиц группы 0 (I) — антитела к антигенам А и В, у лиц группы А (II) — анти-В-антитела, у лиц группы В (III) — анти-А-антитела, у лиц группы АВ (IV) нет антител к антигенам системы АВ0. Интересный факт: группа крови определяется не только у человека, но и почти у всех видов теплокровных животных

Доза крови или единица крови

Донорская кровь в объеме 450 ± 10% мл, заготовленная в полимерном контейнере.

Донация

Процесс взятия крови донора или ее компонентов, предназначенных для переливания или другого использования в медицинских целях.

Донор

Человек, от которого получают (заготавливают) кровь или ее компоненты, предназначенные для переливания или другого использования в медицинских целях.

Донор клеток крови

Человек, из крови которого аппаратным методом извлекают лейкоциты и тромбоциты для приготовления лейкоцитного и тромбоцитного концентратов, используемых при лечении больных.

Донорская кровь

Кровь, сданная донором, разделенная на компоненты и обработанная для переливания или производства лекарственных средств.

ИФА (иммуноферментный анализ)

Метод лабораторной диагностики крови, основанный на выявлении продуктов жизнедеятельности возбудителя инфекции, так называемых белков-маркеров. Применяется для диагностики сифилиса, ВИЧ-инфекции, вирусных гепатитов. Метод ИФА используется также для определения антител при различных инфекционных заболеваниях, уровня гормонов, аутоантитеп и различных маркеров онкологических заболеваний.

Карантинизация (карантинное хранение, карантин) плазмы

Хранение свежезамороженной плазмы с запретом использования на протяжении 180 суток. По истечении этого срока должно быть проведено повторное обследование донора с определением клинических и лабораторных признаков гемотрансмиссивных инфекций.

При отсутствии признаков заболевания свежезамороженная плазма выдается для лечебного применения (читать подробнее).

Категории доноров

Выделяемые в социально-этическом плане группы доноров. Сейчас различают три основные категории доноров: активные доноры, доноры резерва и доноры-родственники.

Активными (кадровыми) являются доноры, состоящие на постоянном учете в учреждении службы крови и сдающие кровь регулярно несколько раз в год в полной дозе (400—450 мл).

Донорами резерва являются лица, которые привлекаются к донорству в организационном порядке и сдают кровь либо в учреждениях службы крови, либо по месту работы (учебы), как правило, не более 1—2 раз в год.

Доноры-родственники — это люди, дающие кровь, как правило, однократно и безвозмездно для близкого человека.

Все более широкое использование крови в лечебных целях вызвало появление специальных категорий доноров (доноров крови, доноров плазмы, доноров клеток крови, доноров костного мозга).

Келл-принадлежность

В последние годы донорскую кровь стали проверять не только на групповую (AB0) и резус-принадлежность, но и на присутствие так называемого келл-антигена. Речь идет об определенной молекуле, которая может присутствовать или не присутствовать на поверхности красных клеток крови (эритроцитов), аналогично резус-фактору. Никакого вреда для здоровья от присутствия келл-антигена нет.

Переливание эритроцитов от келл-положительного донора келл-отрицательному больному может вызвать серьезные осложнения — точно так же, как при переливании эритроцитов от резус-положительного донора резус-отрицательному больному. Но, в отличие от ситуации с резус-принадлежностью, подавляющее большинство людей (в России — более 90%) келл-отрицательны. Соответственно, эритроциты от келл-положительных доноров редко бывают пригодны для переливания больным, а согласно приказу Министерства здравоохранения № 363 от 2002 г. отделения и станции переливания крови вообще не должны выдавать такие эритроциты в клиники.

Поэтому келл-положительным людям кажется, что они не могут быть донорами. Однако это не так, они могут сдавать компоненты крови, которые не содержат эритроцитов, то есть тромбоциты и плазму.

Криоконсервирование

Технология сохранения компонентов крови с использованием низких температур.

Кроводача

Процедура, в ходе которой донор сдает 450 мл цельной крови, что считается стандартной дозой.

Компоненты крови

Используемые в лечебных целях клетки (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты) или плазма, выделенные из донорской крови

Лейкоциты

Белые кровяные клетки. Играют важную роль в борьбе с болезнетворными организмами: уничтожают чужеродные клетки и тем самым защищают организм от их разрушительного влияния. Постоянное слишком большое или слишком малое количество лейкоцитов в крови может свидетельствовать о наличии серьезных заболеваний. В крови человека есть несколько разновидностей лейкоцитов. Например, гранулоциты используются для переливания при инфекционном сепсисе. Сдача гранулоцитов обычно производится по необходимости, так как эти клетки хранятся не более 24 часов. Гранулоциты нужны для пациентов, у которых на данный момент сильно ослаблен иммунитет (как правило, это результат химиотерапии). Гранулоциты должны быть перелиты реципиенту в течение суток, иначе переливание не принесет должного результата.

Образец донорской крови

Часть крови, взятой у донора, предназначенная для исследования.

Обращение донорской крови и ее компонентов

Совокупность процессов, связанных с донорством: отбор и обследование доноров, заготовка, исследование донорской крови и ее компонентов, их хранение, транспортировка, применение, утилизация.

Переливание крови (гемотрансфузия)

Введение с лечебной целью в сосудистое русло больного (реципиента) крови донора или ее компонентов.

Плазма крови

Жидкая часть крови. На 90% состоит из воды. В плазме содержатся разнообразные питательные вещества: белки, жиры, углеводы, гормоны, витамины, соли, необходимые для построения тканей организма и поддержания их жизнедеятельности, а также органические вещества, регулирующие обмен веществ. Плазма широко используется в лечебных целях в хирургии, акушерстве и гинекологии, онкологии и других областях медицинской практики. Процедура взятия из крови донора плазмы называется плазмаферез (см. плазмаферез).

Плазмаферез

Процедура взятия из крови донора плазмы. Во время процедуры сдачи плазмы кровь собирается в аппарат, отделяющий плазму от эритроцитов и тромбоцитов, возвращая эритроциты и тромбоциты обратно донору. Донорская плазма может быть получена и из дозы цельной крови (читать подробнее).

Препараты донорской плазмы

Лекарственные средства, полученные путем переработки плазмы крови.

Основные препараты донорской плазмы:

ПЦР (полимеразная цепная реакция)

Метод лабораторной диагностики инфекционных заболеваний. В частности, широко применяется для диагностики заболеваний, передающихся половым путем.

Анализ методом ПЦР основан на обнаружении в материале исследования небольшого фрагмента ДНК возбудителя инфекции. Результат ПЦР-диагностики обычно можно получить через 1,5—2 суток после сдачи анализа крови

Резус-принадлежность

Наличие или отсутствие антигена резус D на эритроцитах.

Эритроциты примерно 85% людей несут эритроцитарный антиген (белок), поэтому их относят к резус-положительным (имеют антиген D) обозначают Rh+, у 15% людей его нет, они резус-отрицательны (не имеют антиген D) обозначают Rh–.

Кроме человека этот антиген содержится в эритроцитах крови макаки-резуса, от которого и получил название.

Резус-принадлежность не зависит от группы крови по системе АВ0, не изменяется в течение жизни, не зависит от внешних причин. Антиген резус D появляется на ранних стадиях внутриутробного развития, у новорожденного уже обнаруживается в существенном количестве.

Определение резус-принадлежности крови применяется в общей клинической практике при переливании крови и ее компонентов, а также в гинекологии и акушерстве при планировании и ведении беременности.

Несовместимость крови по резус-принадлежности (резус-конфликт) при переливании крови наблюдается, если эритроциты донора несут антиген Rh(D), а реципиент является резус-отрицательным. В этом случае у резус-отрицательного реципиента начинают вырабатываться антитела, направленные против резус-антигена, приводящие к разрушению эритроцитов, что может вызвать тяжёлую и опасную для жизни реакцию. Переливать компоненты крови от донора к реципиенту нужно строго соблюдая совместимость не только по группе крови, но и по резус-принадлежности.

Определение группы крови, резус-фактора, а также наличия аллоиммунных антиэритроцитарных антител должно проводиться при планировании или во время беременности для выявления вероятности иммунологического конфликта матери и ребёнка, который может приводить к гемолитической болезни новорождённых. Возникновение резус-конфликта и развитие гемолитической болезни новорождённых возможно в том случае, если беременная резус-отрицательна, а плод — резус-положителен. В случае если у матери Rh+, а плод — резус-отрицателен, опасности гемолитической болезни для плода нет.

В настоящее время существует возможность медицинской профилактики развития резус-конфликта и гемолитической болезни новорождённых. Все резус-отрицательные женщины в период беременности должны находиться под наблюдением врача. Необходимо также контролировать в динамике уровень резус-антител.

Реинфузия крови

Возврат реципиенту или донору компонентов собственной крови.

Реципиент

Человек, которому переливают донорскую кровь или ее компоненты.

Служба крови

Совокупность медицинских организаций, осуществляющих отбор и обследование доноров крови и ее компонентов, заготовку, исследование, хранение, транспортирование и утилизацию донорской крови и ее компонентов.

Стволовые клетки

Родоначальные клетки, присутствующие в обновляющихся тканях многих видов многоклеточных организмов — кроветворных тканях костного мозга, эпителиальных тканях кожи и пищеварительного тракта и в ряде других.

Стволовые клетки размножаются и дифференцируются в специализированные клетки, т. е. превращаются в клетки различных органов и тканей, и восполняют потери специализированных клеток в результате их естественной (возрастной и физиологической) гибели, при травмах, болезнях и т. п. Стволовые клетки сохраняются и функционируют и во взрослом организме, благодаря им может осуществляться обновление и восстановление тканей и органов. Тем не менее, в процессе старения организма их количество уменьшается.

Установлено, что стволовые клетки могут дифференцироваться даже в такие высокоспециализированные клетки, как нейроны головного мозга, которые даются организму на всю жизнь и, как считалось, не восстанавливаются.

Способность стволовой клетки быть началом совершенно различных видов клеток называется полипотентностью.

Особенно активно стволовые клетки вырабатываются костным мозгом развивающегося организма.

Типирование костного мозга

Определение HLA-генотипа стволовых клеток для совместимости клеток донора и клеток репициента. Производится до процедуры донорства (эксфузии) костного мозга путем взятия 7 мл венозной крови.

Информация о типировании вносится в Российский регистр доноров гемопоэтических клеток (читать подробнее).

Трансфузиология

Трансфузиология (трансфузионная медицина) — это раздел клинической медицины, изучающий вопросы переливания человеку крови и ее препаратов, а также кровезамещающих и плазмозамещающих жидкостей с лечебной целью. Предметом исследования трансфузиологии являются различные трансфузионные среды (методы их получения, хранения и использования) и механизм их действия на организм человека.

Тромбоциты

Клетки крови, участвующие в процессе свертывания крови.

Процедура взятия тромбоцитов из крови донора называется тромбоцитаферез (см. тромбоцитаферез).

Переливание тромбоцитного концентрата в настоящее время является обязательным компонентом терапии онкологических заболеваний системы крови, апластической анемии. Переливанием тромбоцитов сопровождаются курсы химиотерапии.

Трансплантация костного мозга (ТКМ) (или трансплантация стволовых кроветворных клеток периферической крови (ТСКК))

Метод лечения гематологических заболеваний, при котором пациенту после проведения иммуносупрессивной терапии вводят стволовые кроветворные клетки (СКК). Источником СКК может быть костный мозг или периферическая кровь.

Тромбоцитаферез

Процедура взятия тромбоцитов из крови донора. Кровь донора в аппарате центрифугируется, происходит выделение тромбоцитов и плазмы, т. е. тромбоциты и некоторое количество плазмы (обычно около 300 мл) отделяются, а остальные компоненты крови возвращается донору (читать подробнее).

Хилёз

Через 10—12 часов уровень триглицеридов в крови снижается к исходному уровню (читать подробнее).

Цитратная реакция

Непереносимость организмом цитрата натрия (натрий лимоннокислый трехзамещенный 2-водный).

Цитрат натрия применяют при донорстве тромбоцитов (см. тромбоцитаферез), чтобы избежать свертывания крови при ее прохождении через центрифугу для выделения из нее тромбоцитов и плазмы.

Основа действия цитрата в том, что он связывает ионы кальция (ионы кальция необходимы в процессе свертывания крови), из-за чего при донации тромбоцитов возможны неприятные ощущения в мышцах лица, рук.

Для предупреждения и лечения таких реакций донору вводят внутривенно глюконат кальция для восстановления уровня кальция в организме.

Кроме того, регулярным донорам тромбоцитов рекомендуем принимать кальцийсодержащие витамины, а также продукты, богатые кальцием ( читать подробнее ).

Эритроциты

Клетки крови, содержащие гемоглобин. Эритроциты переносят кислород от легких к тканям тела, а от них к легким — углекислый газ. Эритроциты образуются в костном мозге.